Com aïllen els ADN els científics per estudiar-lo?

Com aïllen els ADN els científics per estudiar-lo?
Anonim

Resposta:

Hi ha un parell de passos per fer-ho, ignori el meu anglès dolent, espero que encara pugueu entendre el procés.

Explicació:

Això no és tan difícil com es pugui pensar.

Diguem que volem aïllar l’ADN d’un timus de vedella, cal seguir aquestes instruccions (són el mateix per a una poma pel que sé, però hi ha petites variacions):

  1. Prengui 3 trossos de 3 grams i talleu-lo en trossos diminuts, el més petit possible.

  2. Poseu-lo en una liquadora, amb 75 ml de citrat de sodi salí (SSC) per peça i assegureu-vos que la fulla del liquador estigui completament recoberta amb SSC, de manera que afegiu un tros de timo si ho necessiteu.

    SSC s'assegura que les membranes cel·lulars es dissolen.

    Seguiu barrejant fins que tot estigui llis.

  3. Poseu-lo en un tub per a la centrífuga i tareu-lo amb un altre tub perquè la centrífuga no es trenqui

  4. Col·loqueu el tub a la centrífuga durant 20 minuts a 5000 rpm

  5. Quan traieu els tubs de la centrífuga, hauríeu de veure dos components. El fons té una substància sòlida, això es diu el "pellet" i això manté els nuclis cel·lulars amb l'ADN. També veureu una substància líquida, que s’anomena el sobrenedant i consisteix en la SSC amb les membranes cel·lulars dissoltes.

  6. Aboqui el sobrenedant en un sol moviment de fluids, això es diu decantació i això us deixa a la pellet.

  7. Poseu una petita quantitat de NaCl 2,2 M al tub amb el grànul, de manera que el pellet s'acaba de cobrir amb NaCl. El NaCl provoca precipitar les proteïnes que envolten l'ADN.

  8. Remeneu-lo amb un tub d'assaig buit o una vareta d'agitat. Finalment, hauríeu d’obtenir dos components. Les proteïnes del fons i un líquid viscós a la part superior.

  9. Traieu el líquid viscós amb una pipeta i assegureu-vos que no agafeu cap proteïna amb el líquid viscós. (Les peces molt petites de proteïnes són molt difícils d’evitar, però tracteu d’evitar tantes proteïnes com sigui possible)

  10. Poseu el líquid viscós que pipeteu en un got i afegiu-hi 2x d’etanol. Però afegiu l’etanol suaument perquè no voleu barrejar-lo amb l’ADN. A la interfície entre l’etanol i el líquid viscós, s’haurien de veure bombolles d’ADN.

  11. Agitar suaument amb una vareta de vidre, l'ADN es carrega negativament de manera que s'adhereixi a la vareta.

  12. Poseu-lo en un tub d’assaig i dissoleu-lo amb SSC.

Una màquina especial us pot dir quina quantitat d'ADN heu aïllat i quina puresa.