Per què es mantenen els enzims de restricció en una solució de glicerol al 50%?

Per què es mantenen els enzims de restricció en una solució de glicerol al 50%?
Anonim

Resposta:

Per mantenir-les intactes …

Explicació:

Els enzims de restricció s’utilitzen en quantitats MOLT petites, però normalment s’adquireixen en lots lleugerament més grans.

Si per cap altra cosa, normalment prefereixes fer diferents proves amb el mateix lot. Per tant, el lot comprat ha de ser emmagatzemat durant un temps llarg.

La majoria dels enzims estan perfectament feliços en el seu buffer a 4 graus Celsius durant un temps, però finalment es degradaran. Les 24 hores solen ser el límit acceptat.

Per a un emmagatzematge a llarg termini, el lot ha de ser congelat. -20C és l'estàndard i el mantindrà durant diversos mesos. Per a períodes encara més llargs (per exemple, un o més anys) -70C és la norma.

Cal congelar-la ràpidament i en petits recipients (per exemple, Eppendorfs) per evitar descongelar / refrescar massa sovint.

Per evitar danys a la proteïna a temperatures tan baixes, els estabilitzadors poden / haurien d’afegir-se, com ara la TDT (Di-Thio-Treitol), l’albumina sèrica i, sobretot, el glicerol (5-50%)

Curiosament, a -20 ºC és necessari utilitzar el glicerol 50%, mentre que a -70 el glicerol no és realment necessari, tot i que la seva addició pot ajudar a estabilitzar la proteïna.