Per què és essencial que s'utilitzi el mateix enzim de restricció per tallar (tallar) l'ADN d'ambdós organismes usats per crear un organisme transgènic?

Per què és essencial que s'utilitzi el mateix enzim de restricció per tallar (tallar) l'ADN d'ambdós organismes usats per crear un organisme transgènic?
Anonim

Resposta:

Mirar abaix…

Explicació:

Els enzims de restricció es tallen en seqüències específiques per la qual cosa s'ha d'utilitzar el mateix enzim de restricció perquè produirà fragments amb els mateixos extrems enganxosos complementaris, cosa que permetrà formar enllaços entre ells.

Hi ha certs llocs de restricció compatibles que es poden utilitzar junts. Xho1 i Sal1 són exemples. Els seus extrems enganxosos coincideixen i poden lligar-se junts. Però la lligació mata tant el lloc Xho1 com el Sal1, de manera que no podeu utilitzar cap d’aquests per tallar-lo de nou (a les ubicacions de la lligadura).

També podeu utilitzar l'exonucleasa o la PCR per fer que els extrems siguin més enganxosos (5 o 3 sobrecàrregues) a llocs contundents: d'aquesta manera podeu lligar-los a un lloc tallat sense contundències - però, generalment, també es matarà el lloc contundent.