Què és l’enfocament cromatogràfic?

Què és l’enfocament cromatogràfic?
Anonim

Resposta:

El cromatofocalització és una tècnica de separació de proteïnes que permet la resolució de proteïnes individuals i altres amfolits a partir d'una barreja complexa segons les diferències en els seus punts isoelèctrics.

Explicació:

Aquesta tècnica va ser introduïda per Stuyterman i els seus col·legues entre el 1977 i el 1981. El cromatofocalització utilitza resines d'intercanvi iònic i normalment es realitza en una cromatografia ràpida de líquid.

Utilitza un embolcall de columna d’anàlisi iònic i un gradient de pH generat internament que recorre la columna com a front retingut. La interacció entre el gradient de pH i les substàncies anfóteres, com ara les proteïnes, fa que aquestes substàncies surten de la columna cromatogràfica en llocs característics de l’efluent com a bandes centrades.

Aquesta tècnica de cromatografia d’elució gradual és una potent eina de purificació respecte a les proteïnes, ja que pot resoldre espècies molt similars amb prou feines diferents entre els límits de pH de 0,02, que poden no separar-se bé utilitzant estratègies tradicionals d’intercanvi iònic.