Resposta:
Normalment es tracta d’una prova d’especificitat d’anticossos.
Explicació:
En un ELISA és molt difícil saber si el vostre anticòs s’uneix o no a la vostra proteïna d’interès, una proteïna completament diferent o una gamma de proteïnes.
El Western Blot s’utilitzarà per comprovar l’especificitat de l’anticòs (heu de tenir en compte que la transferència Western pot no detectar totes les reaccions creuades amb proteïnes incorrectes).
A Western blot, podeu veure la mida de la proteïna a la qual es vincula l’anticòs (no podeu fer-ho en un ELISA). Per tant, per exemple, si el vostre anticòs hauria de lligar-se a una proteïna de 56 kDa i veieu una banda de 56 kDa a la taca, podeu estar segur que l’anticòs s’adjunta a la proteïna correcta.
Si, en canvi, vau veure una banda a 32 kDa, podríeu concloure que l’anticòs s’adjunta a la proteïna equivocada. De la mateixa manera, si moltes bandes apareguessin a Western blot, això suggeriria (en absència de degradació de proteïnes) que l’anticòs s’adjuntava a un rang de proteïnes diferents.
En l’exemple de la banda de 32 kDa que apareixia al gel, i també de les múltiples bandes, suggeriria que l’anticòs no tingués especificitat per a ELISA i que qualsevol resultat vist a l’ELISA no pot ser específic de la proteïna d’interès.
Si tingués aquest tipus de prova, podria incloure algun tipus de reactiu "interferent" per provar l’anticòs. Per exemple, si jo hagués plantejat el meu anticòs a un pèptid, podria incloure el pèptid a la solució primària d’anticossos per provar l’enllaç correcte. És a dir, en presència del pèptid no hauria de veure cap banda o cap resultat de l'ELISA, ja que el meu anticòs primari no seria capaç de lligar-se a causa de la presència d'un excés de pèptid.
Què és un exemple de pedant, sense fer servir la paraula?
Pedàntic té dues definicions principals: (1) ser ostentós (vistós) en l'aprenentatge (com utilitzar paraules grans -sessencialment fins al punt de l'avorriment]; i (2) estar massa preocupat pels petits detalls i tràmits. Ara que hem inclòs les dues definicions de pedant, podem formular algunes frases que transmeten la idea sense utilitzar la paraula ni la seva definició.Heus aquí dos exemples per a la primera definició de pedant: 1.) El metge va dir al pacient: "Sembla que ha contractat una infinitat d’infeccions per helmints, el nostre dispositiu d’imatge per resso
Què és una veu passiva i com la fem servir? + Exemple
La veu passiva s'utilitza per centrar-se en la persona / cosa afectada per una acció. Normalment, l'executant de l'acció arriba primer i és el subjecte del verb (aquesta és la forma activa del verb). L’altra persona / cosa afectada és l’objecte del verb. Per exemple. : Jo t'ensenyo. (Aquí, sóc el subjecte i sou l’objecte). En veu passiva, la persona / cosa que ha estat afectada és l'objecte del verb i l'executant de l'acció es converteix en l'objecte. Per exemple. : T'ensenyat per mi. (Aquí, sou el subjecte i jo sóc l'objecte). E
Per què s'utilitza GAPDH en Western Blot? + Exemple
GAPDH s'utilitza sovint com a control de càrrega. En Western blotting solem utilitzar GAPDH com a control de càrrega. Això significa que si sondegem per GAPDH podem comprovar que tenim quantitats equivalents carregades de proteïnes en diferents carrils de la taca. Un exemple d’ús - diuen que tenim una malaltia que pensem provoca l’elevació d’una determinada proteïna a la cèl·lula. Formaríem una mostra de cèl·lules "sanes" i una altra mostra de cèl·lules "malaltes". A continuació, carregarem quantitats de proteïna equival