Resposta:
Per purificar la fracció de proteïnes …
Explicació:
Si esteu purificant una proteïna (sovint específica), haureu de desfer-vos de la quantitat possible d’escombraries que us pugui vincular.
Depèn en certa mesura de quina proteïna segueix, però en general és una bona idea, sobretot a preparatiu purificació, per desfer-se de tantes impureses com sigui possible.
1:
Com que les proteïnes són generalment grans i, en conseqüència, apareixeran a les bandes més baixes de la vostra fracció (ultracentrifugada), voleu desfer-vos de tots els àcids nucleics, especialment si la proteïna que esteu afectant és de tipus similar a la de Pol1, Transcriptasa inversa o qualsevol altre enzim implicat en la replicació / transcripció / traducció.
Podeu separar els àcids nucleics presents a la mostra utilitzant un DNAse: això hidrolitzarà totalment l’ADN a les seves parts constituents.
Tingueu en compte que hi ha diversos ADNs, tots diferents en el seu mecanisme i especificitat per al seu substrat. Segons l’ADN que s’utilitzi, pot mostrar-ne qualsevol Endo- o bé Exo- activitat nucleasa …
Més a propòsit, RNAse és més adequat, ja que el RNA sol ser més dins del rang de flotabilitat / fracció de les proteïnes i pot estar lligat a la proteïna.
2:
Lisozima: Un enzim que té almenys dues funcions:
Desglicolitza els enzims: la majoria de les proteïnes transportades al torrent sanguini són glicosilades: tenen algunes molècules de sucre connectades a elles. La lisozima eliminarà els residus de sucre.
També té la capacitat de descompondre la paret cel·lular dels bacteris Gram-Positius, provocant-los que ho facin lisa. (si voleu purificar la proteïna dels bacteris Gram-positius)
Qualsevol producte degradat, tant d’àcid nucleic com de sucre, apareixerà a les fraccions superiors del tub de centrífuga a causa de la seva flotabilitat "més lleugera".
Quins són alguns exemples de mètodes de purificació de proteïnes?
Filtració de la membrana de diàlisi de precipitacions Si coneixeu el punt isoelèctric de la proteïna, podeu precipitar i filtrar o centrifugar la fracció proteica mitjançant un ajust de pH. Les proteïnes són molècules bastant grans i la diàlisi o la filtració de membranes es poden utilitzar per eliminar les impureses que passaran fàcilment pels porus d'una membrana mentre conserven la fracció proteica.
Per què són necessaris els detergents per extreure proteïnes integrals de la membrana, però no les proteïnes de la membrana perifèrica?
Les proteïnes extrínsules o perifèriques es mantenen lliurement a la membrana, la seva eliminació és fàcil. Es poden eliminar simplement canviant el pH. Les proteïnes intrínseques estan profundament incrustades a la membrana, per la qual cosa són necessàries detergents per a la seva il·lusió.
La farina de soja és un 12% de proteïna, la farina de blat de moro és un 6% de proteïna. Quantes lliures de cadascuna hauria de barrejar-se per obtenir una barreja de 240-b que és un 7% de proteïnes? Quantes lliures de farina de blat de moro hauria de tenir en la barreja?
L’única diferència entre aquesta i http://socratic.org/s/aAWWkJeF és el valor real utilitzat. Utilitzeu la meva solució com a guia per resoldre-la. He mostrat dos mètodes d’enfocament.